溫濕度:確保實(shí)驗(yàn)室溫度穩(wěn)定(20-25°C),濕度≤60%,避免鏡片起霧或金屬部件生銹。
防塵:檢查顯微鏡防塵罩是否完好,移除罩子后先用吹氣球或軟毛刷輕掃表面灰塵。
電源與線路:
檢查電源線、LED控制器連接是否牢固,避免接觸不良。
確認(rèn)電源電壓穩(wěn)定(尤其使用進(jìn)口設(shè)備時注意電壓適配)。
LED光源狀態(tài):
檢查各熒光通道(如DAPI、FITC、TRITC)對應(yīng)的LED模塊是否正常點(diǎn)亮。
驗(yàn)證激發(fā)光波長是否匹配濾光片組(如470 nm LED需匹配FITC濾光片)。
明場LED:開機(jī)后逐步調(diào)高亮度,觀察是否均勻無閃爍。
熒光LED(若配備):
物鏡/目鏡:
用鏡頭紙蘸無水乙醇(或?qū)S们鍧崉﹩蜗蜉p擦,避免劃痕。
特別注意高倍物鏡(如100×油鏡)前端是否殘留干涸的鏡油。
濾光片與熒光模塊:
檢查熒光濾光片組(激發(fā)濾光片、二向色鏡、發(fā)射濾光片)是否有灰塵或霉斑。
使用壓縮空氣吹掃濾光片表面,必要時用棉簽蘸乙醇清潔邊緣(勿觸碰鍍膜面)。
第一步:僅開啟顯微鏡主體電源,靜置10分鐘,使電路和LED光源逐步穩(wěn)定。
第二步:啟動明場LED光源,從最低亮度緩慢提升至常用強(qiáng)度(避免瞬間高電流沖擊)。
第三步(熒光顯微鏡):依次開啟各熒光通道LED,觀察激發(fā)光輸出是否穩(wěn)定。
科勒照明調(diào)整(明場模式):
放置空白玻片,使用10×物鏡,關(guān)閉孔徑光闌。
調(diào)節(jié)聚光鏡高度和調(diào)中螺絲,使視野中光斑均勻居中。
打開孔徑光闌至物鏡數(shù)值孔徑的70%-80%。
熒光光路校準(zhǔn):
使用標(biāo)準(zhǔn)熒光微球或校準(zhǔn)玻片(如熒光染料包被玻片)。
檢查各通道圖像是否對齊,避免色差或偏移(尤其多色熒光實(shí)驗(yàn))。
調(diào)節(jié)熒光模塊的聚焦鏡(若有),確保激發(fā)光精準(zhǔn)聚焦于樣品平面。
避免頻繁開關(guān):LED光源冷啟動時電流沖擊較大,建議實(shí)驗(yàn)間隔超過30分鐘再關(guān)閉。
散熱管理:檢查顯微鏡散熱風(fēng)扇是否正常運(yùn)轉(zhuǎn),避免LED模塊過熱(部分高端機(jī)型內(nèi)置溫度保護(hù))。
光毒性控制:盡管LED光源比汞燈溫和,但仍需限制曝光時間和強(qiáng)度(如使用中性密度濾光片)。
多通道切換:切換熒光通道時,先關(guān)閉當(dāng)前LED再開啟下一通道,避免電路過載。
若使用油鏡(100×),檢查鏡油是否變質(zhì)(長時間未用可能氧化),使用后及時用二甲苯或?qū)S们鍧崉┎潦梦镧R。
現(xiàn)象 | 可能原因 | 解決方案 |
---|---|---|
明場LED亮度不均勻 | LED模塊老化或污染 | 清潔聚光鏡和光路;聯(lián)系廠商檢測LED壽命 |
熒光信號弱 | 濾光片污染或LED波長偏移 | 清潔濾光片;使用校準(zhǔn)玻片驗(yàn)證激發(fā)效率 |
圖像有黑色斑點(diǎn) | 相機(jī)CMOS灰塵或物鏡污染 | 清潔相機(jī)傳感器(需專業(yè)人員操作) |
LED閃爍或自動關(guān)閉 | 電源不穩(wěn)定或過熱保護(hù)觸發(fā) | 檢查電源;暫停使用待設(shè)備冷卻后重啟 |
定期點(diǎn)亮LED:即使不使用,建議每2周開啟LED光源10分鐘,防止電容老化。
記錄使用日志:登記開機(jī)時間、LED工作時長、異?,F(xiàn)象,便于追蹤設(shè)備狀態(tài)。
年度專業(yè)維護(hù):安排廠商對LED驅(qū)動電路、散熱系統(tǒng)進(jìn)行深度檢測。
LED光源顯微鏡雖比傳統(tǒng)汞燈顯微鏡更耐用,但長假后的系統(tǒng)性檢查仍不可或缺。通過規(guī)范的開機(jī)流程、精準(zhǔn)的光路校準(zhǔn)和科學(xué)的維護(hù)策略,可顯著延長設(shè)備壽命并保障實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性。如遇復(fù)雜故障(如LED波長漂移、電路板異常),請及時聯(lián)系專業(yè)工程師處理。
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